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    如何選擇合適的核酸提取儀
    文章來源:未知      發布者:admin
    產品名稱
      如何選擇合適的核酸提取儀
     
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    如何選擇合適的核酸提取儀

     


     

    生物技術的發展日新月異,隨著PCR技術在各個領域的應用,包括醫學方面疾病檢測、農業方面轉基因檢測以及其他很多方面的應用等,高通量的樣本核酸提取已經變得極為迫切,很多公司推出了全自動核酸提取的儀器,各種原理的都有,亂花漸欲迷人眼,有中看不中用的,貴還不好用的,如何選擇一款合適的核酸自動提取儀,就得細細分析,免得花了冤枉錢,整一堆擺設回來。

    核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。

     

    核酸提取儀分類

     

     

    1. 根據儀器型號大小不同劃分 

    1) 自動液體工作站

    自動液體工作站是功能非常強大的設備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴增、檢測等功能,實現標本提取、擴增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應用,不太適合常規實驗室提取核酸,一般都應用在單一類標本并且一次提取標本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。

    2) 小型自動核酸提取儀

    小型的自動化儀器是通過運行結構的特殊性來達到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應用。

    2. 根據提取原理不同劃分

    1) 采用離心柱法的儀器

    離心柱法核酸提取儀主要采用離心機和自動移液裝置相結合的方法,通量一般在1-12個樣本,操作時間和手工提取差不多,并不能提高實際工作效率,且價格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經費充足的大型實驗室使用。

    2) 采用磁珠法的儀器

    以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過移動磁珠或轉移液體來實現核酸的整個提取純化過程。由于其原理的獨特性,所以可設計成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個樣本,且其操作簡單快捷,提取96個樣本僅需30-45min,大大提高了實驗效率,且成本低廉,因而可以在不同實驗室使用,是目前市場上的主流儀器。

    磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法

    先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法最大的問題在于,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能徹底的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。

    再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉移到下一個步驟相應的反應孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器最好要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽最好獨立溫控,這樣可以設置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機要能帶動磁棒進行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗徹底。磁棒法的通量選擇最好是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現實的問題,96個磁力棒在從一個板轉移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。

     

    磁珠法核酸提取儀的基本原理概括總結

     

    1. 抽吸法,也叫移液法,是通過固定磁珠、轉移液體來實現核酸的提取,一般通過操作系統控制機械臂來實現轉移。提取過程如下:

    1) 裂解:在樣品中加入裂解液,通過機械運動及加熱實現反應液的混勻及充分反應,細胞裂解,釋放核酸。

    2) 吸附:在樣品裂解液中加入磁珠,充分混勻,利用磁珠在高鹽低PH值下對核酸具有很強親和力的特點,吸附核酸,在外加磁場作用下,磁珠與溶液分離,利用吸頭將液體移出棄至廢液槽,吸頭棄掉。

    3) 洗滌:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗滌緩沖液,充分混勻,去除雜質,在外加磁場作用下,將液體移出。

    4) 洗脫:撤去外加磁場,換用新吸頭加入洗脫緩沖液,充分混勻,結合的核酸即與磁珠分離,從而得到純化的核酸。

    2. 磁棒法

    磁棒法是通過固定液體,轉移磁珠來實現核酸的分離,原理和過程與抽吸法的一樣,不同的是磁珠和液體分離的方式。磁棒法是通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現核酸的提取。

     

    磁珠法核酸提取儀的特點

     

    1. 能夠實現自動化、高通量操作。

    2. 操作簡單、快速。

    3. 安全環保。

    4. 高純度,高得率。

    5. 無污染,且結果穩定。

    6. 成本低廉,便于廣泛應用。

    7. 可以同時處理不同類型的樣本。

    注意事項

    1. 儀器的安裝環境:正常的大氣壓(海拔高度應該低于3000m)、溫度20-35℃、典型使用溫度25℃、相對濕度10%-80%、暢通流入的空氣為35℃或以下。

    2. 避免將儀器放置在靠近熱源的地方,如電暖爐;同時為防止電子元件的短路,應避免水或者其他液體濺入其中。

    3. 進風口和排風口均位于儀器背面,同時避免灰塵或纖維在進風口聚集,保持風道的暢通。

    4. 核酸提取儀離其他豎直面至少10cm,

    5. 儀器接地:為了避免觸電事故,儀器的輸入電源線必須接地。

    6. 遠離帶電電路:操作人員不得擅自拆解儀器,更換元件或進行機內調節必須有持證的專業維修人員完成,不要在接通電源的情況下更換元件。

     

     

          

     

     

     

     

     

     

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